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荧光激发块噪音终结者
发布时间:2018-07-19 16:12:04 | 浏览次数:

荧光激发块噪音终结者
由尼康一种创新的荧光滤波器块设计有助于消除发生在荧光显微镜光学路径,极大地提高了发射信噪比残余杂散光的可能性。称为噪声终结者,这种技术会指示偏离杂散光远离物镜聚光的路径,从而导致图像对比度的显着改善。这种互动式的教程演示如何噪音终结者技术功能。


教程初始化含有激发和屏障激发块,以及一个二色镜,出现在窗口中的传统的荧光滤波器光学块(从倒置显微镜)。来自光源的光子(黄色球)从窗口的右手侧进入过滤块并通过激发滤光片,它是一个带通滤波器,允许主要510和560纳米(绿色光)之间的波长穿过。离开激发滤光片(绿球)的光被偏转在由二色镜90度角和最多的目标和标本。一些短和更长的波长,其能够通过激发滤光片的(在教程作为红色和蓝色球体表示)不被二色反射镜偏转并通过。这些光子,这是在荧光显微镜噪声的主要来源的一部分,从光学块的内部反射,并能够穿过屏障激发块以倾斜角度,最终到达检测器。

为了操作教程,使用照明强度滑块来调节进入激发块的光学模块的光子数。该激活噪音终结者复选框(默认禁用)可以启用展示尼康导流技术,有效地捕捉光子,否则将产生噪音。当噪音终结者复选框被激活,光子流经光学块插入终止子管的后部,并通过中性密度材料吸收,从而逸出的显微镜的光路。不得到由中性密度材料吸收任何的光被反射到终止子管在那里最终分散的末端。该显微镜配置单选按钮,可以采用光学块和噪声终止子取向为之间选择倒立(默认)的组织培养物或传统直立式仪器。使用教程速度滑块通过光学块,以控制光子流的速率。

任何荧光显微镜的基本特征是提供一种机制,以选择性地过滤照射,随后通过使用第二滤波器,使在暗背景上具有最大灵敏度的图像形成弱得多的荧光发射信号的隔离检体的激励。在生物样本的局部探针浓度是如此之低,只有激发光的一小部分是由荧光物质吸收了许多实验。那些荧光团是能够吸收照明的数量,这将发射次级荧光的百分比。此外,甚至更低。所得荧光发射的亮度级将介于幅度小于该照明的3至6和命令。因此,在荧光显微镜的根本问题是,产生的样品的高效率照明,同时捕捉微弱的荧光发射被有效地从更强烈的照明带分离。这些条件是通过对激发块坐标基于该二色分光器的操作和性能的激发和发射要求的组合满足现代荧光仪器。

后面的反射光荧光显微镜二色分光镜(反射镜)的功能的原则在在红色(620至660纳米)的可见光光谱的波长的绿色区域(550纳米)和荧光的教程激发光照进行了概述。一种高强度光源输出一个宽的激发波长的光谱在高磁通密度(通常覆盖大部分的紫外线和对整个可见光谱的),它穿过所述照射器和第一遇到选择适当的波长带为激发滤波器(标有激励在本教程激发块)。在这种情况下,激发块通过510和560纳米之间的光的波长具有高效率,但也允许其它波长通过在一个较小程度。激发光下一个到达的二色反射镜,并反射到物镜后孔,以形成照明该沐浴试样的锥体。该二色镜被定位在光路成45度角,并设计成选择性地反射490和565纳米(基本上蓝绿色和绿色波长)之间的波长,而同时发射两个短和更长的波长。(奥林巴斯显微镜)

因为光的仅一个窄的带宽是由二色镜反射,照射波长小于490纳米,并且长于565纳米的管理通过该激发滤光片也通过二色镜发射。需要注意的是激发光的反射是不是100%的效率,因此,少量的绿色光通过二色镜穿过而不被反射。此外,并非所有的光具有波长高于565或低于490纳米的通过反射镜被发送。这种光的一小部分是由通过物镜的反射镜并到达样品反射。通过二色镜从激发滤光片透射光的一部分被平坦黑色涂层在激发块块的内部被吸收,但一些反射从表面并穿过所述屏障激发块以斜角,有助于荧光背景噪声。


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